電穿孔儀是一種利用高電壓電脈沖在細胞膜上形成暫時性納米孔,從而增加細胞膜的滲透性,使得平時不能或很難穿過細胞膜的分子能夠進入細胞內(nèi)的技術(shù)。這項技術(shù)在生物技術(shù)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用,如基因轉(zhuǎn)染、藥物傳遞等。
電穿孔儀的工作原理:
1、電場應(yīng)用:工作時,首先會在含有細胞的介質(zhì)中施加一個短時的、高強度的電場。這個電場通常由電極產(chǎn)生,電極間的距離和電場強度都是可以調(diào)節(jié)的參數(shù)。
2、細胞膜的改變:在電場作用下,細胞膜上會形成納米級的孔洞。這些孔洞的形成機制主要與電場對細胞膜上脂質(zhì)分子的重新排列有關(guān)。電場使得細胞膜上的磷脂分子頭部朝向電場的負極,而疏水的尾部則朝向正極,這種重新排列導(dǎo)致膜的穩(wěn)定性下降,從而形成孔洞。
3、孔洞的動態(tài):這些孔洞是動態(tài)的,它們在電場作用后不久就會自行封閉??锥吹拇嬖跁r間通常很短,從幾毫秒到幾秒不等,具體時間取決于電場的強度、持續(xù)時間以及細胞類型。
4、物質(zhì)傳遞:在孔洞開放的時間里,平時難以穿透細胞膜的大分子(如DNA、RNA、蛋白質(zhì)及某些藥物)得以進入細胞內(nèi)部。這一特性被廣泛應(yīng)用于將外源基因?qū)爰毎?轉(zhuǎn)基因)以及提高某些藥物的療效。
5、細胞的恢復(fù)與應(yīng)用:一旦電場被移除,細胞膜上的孔洞會逐漸閉合,細胞恢復(fù)正常狀態(tài)。這期間,被轉(zhuǎn)入的物質(zhì)可以在細胞內(nèi)發(fā)揮作用。例如,在基因治療中,轉(zhuǎn)入的DNA可以被細胞的核讀取并轉(zhuǎn)錄成蛋白質(zhì)。
總的來說,電穿孔儀是一個強大的工具,它通過物理方式暫時改變細胞膜的通透性,使得細胞吸收或內(nèi)部整合那些通常無法直接通過細胞膜的大分子成為可能。